血管低溫凍存的介質(zhì)——低溫抗凍劑和培養(yǎng)液

1947年，英國生物學(xué)家Polge發(fā)現(xiàn)了10%甘油在人類精子低溫保存中有保護作用；1959年，Lovelock發(fā)現(xiàn)了二甲基亞砜在生物體深低溫凍存中的抗冰晶形成作用，提高了生物組織低溫保存效果。目前低溫保護效果較好的低溫抗凍劑有二甲基亞砜、乙二醇、羥乙基淀粉、聚乙烯吡咯酮等，其中二甲基亞砜是血管保存較理想的滲透性抗凍劑。液氮罐價格

它是一種低分子中性物質(zhì)，微毒性。它的低溫保護作用主要體現(xiàn)在：

①滲透性極強，易進入細胞，易與水進行水合作用，增加溶液黏性，弱化水的結(jié)晶過程。

②純的DMSO冰點為18.6℃，當(dāng)與水以1∶3體積比混合均勻后，溶液冰點降為－70℃。

③減少水分子的轉(zhuǎn)移，進入細胞后，使細胞內(nèi)滲透壓接近細胞外滲透壓，減少細胞脫水，復(fù)溫時也可減小滲透壓變化引起的細胞腫脹，有效的減小血管低溫損傷。

Xu等的研究發(fā)現(xiàn)家兔主動脈在含15%DMSO的保存液中熱膨脹系數(shù)最小，對血管內(nèi)皮細胞活性和血管壁結(jié)構(gòu)完整性有較好的保護作用。過低的抗凍劑濃度不能有效發(fā)揮低溫保護作用，而過高的濃度對于細胞毒性較大，將加重血管損傷。培養(yǎng)液是為離體血管提供介質(zhì)與營養(yǎng)支持的溶液，常用培養(yǎng)液有RPMI1640，M199等營養(yǎng)液，主要成分是質(zhì)，它們的酸堿度和滲透壓與活體內(nèi)細胞外液相似。

可適當(dāng)添加胎牛血清和谷氨酰胺，胎牛血清含有一定的營養(yǎng)成分，提供細胞生長所必需的生長因子、激素及黏附因子等，此外它還具有中和有毒物質(zhì)的作用；谷氨酰胺為細胞提供能量，還是細胞合成蛋白質(zhì)的主要原料。法國學(xué)者Manaa等將腦死亡器官供者的血管分別保存于均含有10%DMSO的RPMI1640和M199保存液中，以相同的降溫、復(fù)溫模式深低溫凍存4個月，復(fù)溫后對其生物機械性能、超微結(jié)構(gòu)、形態(tài)學(xué)和免疫組化等方面進行了分析比較，發(fā)現(xiàn)保存于兩種培養(yǎng)液的血管其管壁均有相似的形態(tài)學(xué)改變，但在細胞活性保存方面，RPMI1640優(yōu)于M199。

Wusteman等的研究發(fā)現(xiàn)保存液中鈉離子向細胞內(nèi)的流動增加了DMSO和PD的細胞毒性，由膽堿替代保存液中的鈉離子，能顯著提高凍存血管平滑肌和內(nèi)皮細胞的存活率。氨基酸、維生素、碳水化合物、無機離子和其他輔助物質(zhì)，它們的酸堿度和滲透壓與活體內(nèi)細胞外液相似。可適當(dāng)添加胎牛血清和谷氨酰胺，胎牛血清含有一定的營養(yǎng)成分，提供細胞生長所必需的生長因子、激素及黏附因子等，此外它還具有中和有毒物質(zhì)的作用；谷氨酰胺為細胞提供能量，還是細胞合成蛋白質(zhì)的主要原料。液氮罐價格

法國學(xué)者Manaa等將腦死亡器官供者的血管分別保存于均含有10%DMSO的RPMI1640和M199保存液中，以相同的降溫、復(fù)溫模式深低溫凍存4個月，復(fù)溫后對其生物機械性能、超微結(jié)構(gòu)、形態(tài)學(xué)和免疫組化等方面進行了分析比較，發(fā)現(xiàn)保存于兩種培養(yǎng)液的血管其管壁均有相似的形態(tài)學(xué)改變，但在細胞活性保存方面，RPMI1640優(yōu)于M199。Wusteman等研究發(fā)現(xiàn)保存液中鈉離子向細胞內(nèi)的流動增加了DMSO和PD的細胞毒性，由膽堿替代保存液中的鈉離子，能顯著提高凍存血管平滑肌和內(nèi)皮細胞的存活率。